Ker bi pri naših poskusih visoka koncentracija soli v originalni vodi negativno vplivala na izide, smo pripravili vzorce voda za testiranje na dva načina z razredčevanjem originalnega pripravka in s prenosom informacije iz originalnega pripravka v bidestilirano vodo.
PRIPRAVA RAZREDČIN
Razredčina Super NN-vode, ki smo jo uporabljali pri poskusih, je bila pripravljena po navodilu proizvajalca v koncentraciji 6 kapljic na liter destilirane vode. Kjer smo za primerjavo uporabili raztopine čistega NaCl oziroma kuhinjske morske soli, smo najprej pripravili raztopino z enako koncentracijo NaCl kot v NN-vodi, potem pa jo za poskuse razredčili v enakem razmerju (6 kapljic na liter destilirane vode).
ZAJEMANJE INFORMACIJE
Poleg tega, da smo pri poskusih uporabljali razredčeno NN-vodo (glej zgoraj), smo del poskusov opravili tudi tako, da smo informacijo, ki jo vsebuje NN-voda, s posebnim postopkom (lasten razvoj) zajeli in jo preko ustrezne naprave (lasten razvoj) posredovali naprej v kemijsko čisto (bidestilirano). Na enak način smo odvajali informacijo tudi iz vode, ki je služila kot kontrola (enako odstotna raztopina morske soli ali pa čistega NaCl). Na ta način smo se izognili možnemu vplivu različne koncentracije ostalih ionov v NN vodi in v kontrolnih pripravkih.
DIGITALNA ELEKTROFOTOGRAFIJA
Eksperimenti so
potekali po našem že utečenem postopku, objavljenem v mednarodni znanstveni reviji z
modifikacijami in izboljšavami v smislu uporabe digitalnega fotoaparata za zajem slik.
Rezultate smo vedno primerjali s kontrolno vodo (kemijsko enako vodo, ki pa ni bila
izpostavljena raziskovanemu vplivu). Pri vsakem primerjanju voda smo opravili po 25
slikanj vodnih kapljic raziskovane in kontrolne vode. Na digitalnem fotoaparatu dobljene
slike smo nato računalniško analizirali (standardni in lastni računalniški programi).
Pri analizi rezultatov smo primerjali parametre, ki opisujejo značilnosti korone, ki
nastane okrog vodnih kapljic med razelektritvijo, to je njeno splošno svetlost,
razporeditev in značilnosti žarkov (snopov z močnejšo ionizacijo, ki se širijo
radialno stran od kaplje), ki jo sestavljajo (jakost, širina, dolžina, kontrast,
homogenost, ekscentričnost) itd. Za vsako kapljico smo dobili za primerjavo po 34
parametrov. Razlike med parametri za posamezne različno upoštevane vode smo statistično
obdelali in jih ovrednotili.
Pri elektrofotografskem testiranju smo v prvem eksperimentu primerjali raztopino NN-vode
(6 kapljic/liter) z ekvivalentno raztopino morske soli, v drugem eksperimentu pa
bidestilirano vodo z uvedenima informacijama NN-vode ter ekvivalentno raztopino
morske soli.
BIOLOŠKI SENZORNI SISTEM
Večletne izkušnje pri razvoju biološkega senzornega sistema občutljivega na zelo šibka sevanja, predvsem na magnetna polja, o čemer imamo tudi mednarodne objave, nam omogočajo aplikacijo tega sistema na različne vrste sevanj in polj, seveda v natančno določenih in kontroliranih pogojih. Biološki senzorni sistem je sestavljen iz kalečih semen kreše Razmeščene so bile v petrijevkah s po 50 semeni v petrijevki. Petrijevke so bilev temi. Po enem dnevu rasti so bile kaleče rastline izpostavljene kontroliranemu toplotnemu stresu. Po dveh dneh smo izmerili dolžino vzkaljenih rastlin. Semena kreše smo zalivali z raztopino, ki je vsebovala Super NN vodo (v koncentraciji 6 kapljic na liter po navodilu proizvajalca), kontrolno skupino pa z destilirano vodo. Za primerjavo smo opravili tudi teste učinkovanja čistega NaCl in kuhinjske morske soli v koncentracijah, ki so navedene na osnovi podatkov laboratorijske analize za Super NN vodo (prav tako po 6 kapljic na liter). Pripravili smo tudi zajem informacije Super NN vode po posebnem postopku (tako da zajamemo samo biološko (ne)ugodno informacijo, ki jo vsebuje Super NN voda brez neposrednega vpliva kemijske sestave) in primerjali rezultate z informacijo, ki jo da voda, pripravljena s kuhinjsko morsko soljo.
Tipi testov:
EKOTOKSIKOLOŠKI TEST
Metoda, ki smo jo uporabili za test Super NN vode je Microtoxov ekotoksikološki test s svetlečimi bakterijami Vibrio fischeri. Tehnologija Microtoxovega testa temelji na uporabi bioluminiscentnih (svetlečih) bakterij za meritev strupenosti vzorcev. Kadar bakterije pravilno gojimo, oddajajo svetlobo kot stranski produkt celičnega dihanja. Celično dihanje je osnova celičnega metabolizma in spremljajočih življenjskih procesov. Ker je bakterijska bioluminiscenca neposredno povezana s celičnim dihanjem, vsaka inhibicija celične aktivnosti (npr. zaradi strupenosti okolja) preko zmanjšanega nivoja dihanja reducira tudi nivo bioluminiscence. Bolj ko je vzorec strupen, manj svetlobe oddajajo bakterije v testni raztopini. Več kot 20 let izkušenj različnih laboratorijev po vsem svetu je pokazalo, da je bakterijska bioluminiscenca primerno merilo celičnega metabolizma in zato zanesljiv senzor za meritve prisotnosti strupenih kemikalij v vodnih vzorcih. Sev NRRL B-11177, ki ga uporabljamo, je bil izbran za akutne in kronične teste, ker je pokazal visoko občutljivost na široko območje kemikalij. Test s svetlečimi bakterijami Vibrio fischeri je standardizirani test na podlagi mednarodnih standardov ISO 11348 ali DIN 38412-34. Raziskave kažejo, da obstaja visoka korelacija rezultatov tega testa z rezultati testa z vodnimi bolhami (Daphnia sp.), ki je v Sloveniji zakonsko določen.
Postopek testiranja
Testiranje je potekalo po mednarodnem standardu ISO 11348. Za ocenitev vpliva vzorca na bakterije je potrebno izmeriti bioluminiscenco bakterij pred dodatkom vzorca in 30 minut po dodatku vzorca. Zanima nas je, za koliko se zmanjša količina oddane svetlobe zaradi dodanega vzorca. To zmanjšanje smo primerjali z bakterijami, ki smo jim kot vzorec dodali kontrolno raztopino (to je raztopino, ki ni strupena za bakterije).
Za vsak vzorec smo pripravili razredčitveno vrsto tako, da smo jo redčili v razmerju 1:2 in tako dobili serijo osmih redčitev. Za vsako redčitev smo izmerili vpliv na bioluminiscenco bakterij. Zanimala nas je najmanjša redčitev vzorca, ki ni več strupena za bakterije. Rezultati so podani v vrednosti LID (Lowest Ineffective Dilution). Višja kot je vrednost LID, bolj strupen je vzorec.
Pri vsakem testu so nujne tudi meritve vpliva validacijskih raztopin, predpisanih s standardom ISO 11348. Validacijske raztopine zmanjšajo bioluminiscenco bakterije Vibrio fischeri na standardizirani način.
Meritve so potekale v skladu z mednarodnim standardom ISO 11348. Izmerili smo strupenost naslednjih vzorcev:
Super-NN smo po navodilih naročnika dodali v razmerju 6 kapljic na liter.
V vzporednih testih smo strupenost naštetih vzorcev primerjali tudi s kontrolnimi, katerim smo dodali Super-NN. Tako smo preverili, ali Super-NN vpliva na same celice bakterij. V primeru vpliva na celice namreč vplivov na bioluminiscenco ne bi mogli pripisati spremembam v vodi.
<< nazaj